Ambientata nel 2258, dieci anni dopo la fine della sanguinosa lotta fra la Terra e l'impero Minbari, la serie si svolge su Babylon 5, una stazione orbitante posta in una zona neutrale di grande importanza strategica e commerciale. Sulla stazione risiedono gli ambasciatori rappresentanti delle 5 più importante razze che dominano l'universo: terrestri, minbari, centauri, vorlon e narn. Durante le prime due stagioni il tenente comandante Susan Ivanova ha una breve relazione con Talia Winters, appartenente al corpo dei telepatici.